Câu chuyện trong Hiệp Đạo Nhất Chi Mai bắt đầu từ cung điện Tufu, một cung cấm của triều đình ở Đông xưởng có nhiều âm mưu lớn. Để có được bản đồ kho báu của nhà Minh, Dongchang và Jinyiwei đã chuẩn bị lực lượng và kế hoạch kỹ lưỡng. Vì vậy, đại thái giám Liu Jin muốn loại bỏ thủ lĩnh của tổ chức thần bí của nhóm Thiên Cơ Môn. Trong lần đột nhập vào cung trộm bản đồ kho báu, Thẩm Diên bị thương rất nặng, Chu Mạt Phong đã giúp cô chạy thoát. Nhưng khi cô lấy trộm xương cốt của cha mình trở về Thiên Cơ Môn, cô mới biết tất cả đây chỉ là một kế hoạch do Đông xưởng dựng lên với mục đích chiếm đoạt kho báu.
Dongchang không chiếm được Yizhimei, cũng không chiếm được “bản đồ kho báu” của Thẩm Diên, nhưng không ngờ lại khiến Thẩm Diên và Yizhimei phải đứng chung một chiếc thuyền. Vì vậy, một mệnh lệnh được ban xuống, đó là bắt sống nhất chi mai và lấy lại bản đồ kho báu. Thẩm Diên cử Chu Mạt Phong dẫn mọi người đến giải cứu Cổng Thiên Tỉ, chờ thời cơ tìm ra bảo vật sau khi tiếp cận Yizhimei, sau đó phái Shen Yuanren đến sửa pháp ngay tại chỗ. Từ đây, cuộc chiến giữa 3 phe phái chính thưc bắt đầu, liệu ai sẽ là kẻ chiến thắng cuối cùng, và có được kho báu?